5 Mar 2011 ... Teknologi Kultur Jaringan Tanaman materi kuliah ... Kultur embrio matang, utk
merangsang ... Kultur untuk perkecambahan biji anggrek.
5/3/2011
Teknologi Kultur Jaringan Tanaman materi kuliah pertemuan ke 7
KULTUR ORGAN (kultur embrio) Sri Sumarsih Fakultas Pertanian UPN “Veteran” Yogyakarta Email:
[email protected] Weblog: Sumarsih07.wordpress.com Website: agriculture.upnyk.ac.id
Kultur embrio
Definisi Kultur Embrio • Isolasi secara steril embrio matang ataupun belum matang, dengan tujuan memperoleh tanaman yang viabel • macam kultur embrio: – Kultur embrio yg belum matang, utk mencegah keguguran : embryo rescue – Kultur embrio matang, utk merangsang perkecambahan : embryo culture
Contoh aplikasi kultur embrio 1. Memecahkan dormansi
• •
Tujuan : membantu perkecambahan embrio mjd tanaman lengkap Diperlukan dlm embrio yg memp masalah :
Menunjukkan masa dormansi yang panjang Embrio hibrida hasil penyilangan interspesifik yg tidak kompatibel dg endospermnya Embrio dg endosperm yg rusak spt kelapa kopyor Embrio tanpa endosperm spt pd anggrek •
Penting dlm ilmu fisiologi, dlm hal perkembangan embrio
Pengertian ttg kebutuhan nutrisi embrio pd berbagai tahap perkembangan (Percobaan media perlakuan ) Kemampuan regenerasi dr potongan2 embrio •
Sangat penting dlm pemuliaan tanaman
– Pd Musa balbisiana, tdk mungkin memperoleh perkecambahan secara normal – Cherry, hazel, acer : tanaman yg memiliki dormansi panjang 2.Mencegah gugurnya embrio pd persilangan interspesifik – Persilangan ini sering menghasilkan biji dengan endosperm yg tdk sempurna, atau embrio yg lemah, kecil. Contoh: Kacang, Kapas, Tomat, Padi.
3. Hibridisasi utk produksi triploid (buah tanpa biji) – Jeruk triploid Citrus sinensis Diploid citrus X tetraploid citrus = jeruk tanpa biji
– Pisang triploid Musa acuminata (AA) X Musa balbisiana (BB) = pisang tanpa biji (AAB)
1
5/3/2011
Faktor yg mempengaruhi keberhasilan kultur embrio 1. Genotipe – Genotip menentukan mudah tidaknya embrio diisolasi dan ditumbuhkan
2. Tahap (stage) embrio diisolasi – prinsipnya embrio yang lebih besar akan lebih baik
3. Tanaman inang – Sebaiknya ditumbuhkan di rumah kaca/ kondisi terkontrol.
5. Lingkungan
4. Media kultur embrio – Hara makro dan mikro – Ph 5.0 – 6.0 – Sukrosa sbg sumber energi. Embrio belum matang perlu 8 – 12%, matang perlu 3%. – Auksin dan sitokinin tidak diperlukan. GA untuk memecahkan dormansi – Vitamin (optional) – Senyawa organik (opt), air kelapa, casein hydrolisate, glutamin (penting)
Kultur untuk perkecambahan biji anggrek
– Oksigen (perlu oksigen tinggi) – Cahaya : kadang embrio perlu ditumbuhkan dlm gelap selama 14 hari, kemudian ditransfer ke cahaya untuk merangsang sintesa klorofil – Suhu : kadang perlu perlakuan dingin (vernalisasi, 4oC) untuk memecah dormansi Anggrek bulan (Phalaenopsis)
2
5/3/2011
Embryo rescue pada anggrek • Biji mrpkan sumber eksplan yg bagus • 1 kapsul anggrek berisi 1500 – 3 juta biji • Biji sangat kecil, hampir tdk memiliki cadangan makanan, shg benih sulit berkecambah di tanah. Mudah terancam kekeringan dan serangan hama penyakit • Perbanyakan in vitro memberi alternatif lingkungan terproteksi, nutrisi yg cukup, dan bebas serangan bakteri atau jamur
Proses perkecambahan • Benih menyerap air melalui testa • Embrio mengalami imbibisi, membengkak, pembelahan sel dimulai, dan embrio menembus kulit biji • Protocorm terbentuk dari massa embrio • Diferensiasi organ dimulai dg pembentukan meristem tunas & rhizoid • Jk ada chy, daun terbentuk, diikuti oleh akar sejati. Rhizoid & protocorm tdk berfungsi lagi dan terdegenerasi
Perkecambahan biji anggrek Biji anggrek tanpa endosperm
Perkembangan protocorm anggrek
Protocorm anggrek
3
5/3/2011
Perkembangan protocorm anggrek menjadi tunas pucuk
Teknik kultur embrio Anggrek: 1. Sterilisasi kapsul/benih anggrek: • Lebih baik menggunakan kapsul (buah anggrek) yg belum terbuka, karena sterilisasi lebih mudah. • Sterilisasi kapsul yg belum terbuka dg cara merendam dlm 95% alkohol dan ‘flaming’ • Di dalam laminer, buka kapsul dg menggunakan skalpel steril. Biji dlm kapsul biasanya steril. • Jk kapsul sdh terbuka, benih perlu disterilisasi. Rendam dlm 2% NaOCl.
2. Cara penanaman benih anggrek (Pierik) • Benih ditaburkan pd permukaan media padat dlm wadah dg permukaan luas, misal. Botol jam atau botol saus yang diletakkan mendatar. • Jangan terlalu banyak benih yg ditanam, supaya setelah benih berkecambah tidak terlalu rapat • Perlu subkultur 2 -3 kali sebelum ditransfer ke tanah
4
