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Effects of washed and autoclaved mineral oil overlay ...

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ABSTRACT. Although droplet method has been widely used in IVF laboratories, the toxic contamination produced by deterio- ration of mineral oil quality and ...
Artigo Original Effects of washed and autoclaved mineral oil overlay used during IVM of bovine oocytes on steroid concentration and preimplantational embryo development. Vireque AA1, Watanabe YF2, Resende LOT3, Bernuci MP4, Martins WP 5, Ferriani RA6 Department of Obstetrics and Gynecology, Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, University of São Paulo, Ribeirão Preto, SP, Brazil. 1,4 PhD, Post-doc of Department of Obstetrics and Gynecology, Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, University of São Paulo 2 PhD, Vitrogen Biotecnologia da Reprodução, Cravinhos - SP, Brazil 3 Masters degree of Department of Obstetrics and Gynecology, Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, University of São Paulo 5,6 MD-PhD, Department of Obstetrics and Gynecology, Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, University of São Paulo

ABSTRACT

deterioração da qualidade do óleo mineral e extração de esteróides a partir do meio de cultura tem sido associada a insuficiente desenvolvimento in vitro e congelabilidade de oócitos e embriões. O uso do óleo lavado e autoclavado com solução salina 0,9% pode ser útil para evitar contaminantes tóxicos em óleo mineral comercial, mas seu efeito sobre a extração dos esteróides do meio de cultura continua indeterminado. Este estudo busca comparar a concentração de esteróides em gotículas de complexos cumulus-oócitos (COCs) em IVM cultivadas em dois tipos de sobreposição de óleo: lavado e autoclavado (WMO) ou óleo mineral em sua formulação comercial (CMO), além de avaliar sua influência sobre o desenvolvimento embrionário subseqüente. COCs bovinos foram cultivados a uma densidade de mL 10/01 em TCM-199 suplementado com E2 a 38,5 ° C, 5% de CO2 e umidade de 100% durante 24 h. ​​ igotos foram co-cultivaApós a fecundação, os prováveis z dos com células cumulus até 224 h pós-inseminação (hpi). Meios foram coletados antes e depois IVM, e armazenadas a -20 ° C. E2 e P4 foram determinados por quimiluminescência e desenvolvimento embrionário de blastocisto foi avaliada por clivagem e taxa de eclosão em 168-224 hpi. E2 e P4 estiveram drasticamente reduzidos (P